Saggio di Benedict: determinazione degli zuccheri riducenti

Il saggio di Benedict è utilizzato per la determinazione qualitativa degli zuccheri riducenti. Questi ultimi sono zuccheri che hanno, in soluzione, un gruppo aldeidico o chetonico libero come i monosaccaridi

I disaccaridi, per avere proprietà riducenti devono presentare, come i monosaccaridi, il gruppo aldeidico o gruppo chetonico di un’unità potenzialmente libero.

Alcuni disaccaridi non sono riducenti a causa della mancanza di carbonio anomerico libero nella loro struttura mentre se è presente un legame semiacetalico che è sempre in equilibrio con l’aldeide o il chetone liberi sono riducenti.

Il saggio di Benedict, unitamente al saggio di Tollens costituiscono le metodiche maggiormente utilizzate per il riconoscimento qualitativo degli zuccheri riducenti.

Reagente di Benedict

Per effettuare il saggio di Benedict occorre preparare il reagente di Benedict dovuto al chimico statunitense Stanley Rossiter Benedict. Per ottenere 1 L di soluzione si solubilizzano 173 g di citrato di sodio e 100 g di carbonato di sodio.
Alla soluzione, sotto agitazione, si uniscono 17.3 g di solfato di rame pentaidrato.
Il reagente di Benedict è di colore blu a causa dello ione Cu²⁺. Il carbonato di sodio rende basica la soluzione e questa è una condizione necessaria per la reazione di ossidoriduzione

Il citrato di sodio è un agente complessante che complessa con gli ioni rame (II) per evitare la loro riduzione a ioni rame (I) nel corso delle fasi preliminari

Reazione nel saggio di Benedict

La reazione netta che avviene nel saggio di Benedict tra il gruppo aldeidico e lo ione Cu²⁺ è:
RCHO + 2 Cu²⁺ + 5 OH^– → RCOO^– + Cu₂O + 3 H₂O

Quando avviene la reazione tra il reagente di Benedict e gli zuccheri riducenti la soluzione cambia colore e si forma un precipitato rosso arancio/rosso mattone di ossido di rame (I)

I carboidrati complessi come gli amidi non reagiscono positivamente al saggio di Benedict a meno che non vengano scomposti tramite riscaldamento o digestione

Risultati

Il saggio di Benedict consente di determinare la presenza di zuccheri riducenti e, dall’aspetto della soluzione e del colore del precipitato, si hanno indicazioni relative alla loro concentrazione.

Se la soluzione rimane di colore blu non è presente uno zucchero riducente mentre se diventa verde ma non avviene precipitazione la quantità di zucchero riducente è di circa lo 0.1% m/m.

Se si ha una precipitazione si possono verificare diversi casi a seconda della concentrazione di zucchero riducente. Man mano che aumenta la concentrazione di zucchero riducente, più il colore finale si avvicina al rosso mattone e maggiore è la quantità di precipitato formato